工作原理
紫外分光光度计由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理显示系统等部件组成。待测物质中的分子在紫外可见光区有选择性吸收某些波长的光,通过测定特定波长范围内透射光强度的变化量,可推算出待测物质的浓度。紫外分光光度计采用单色器,它的功能是将光源发出的连续光谱分解成单一色光,再经过检测器实现测量。待测物质在特定的波长下,具有特定的吸收峰,因此通过测量待测物质在不同波长下的吸光度值,可以推算出待测物质的浓度。
组成结构
主要由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。光源发出的复合光通过单色器被分解成单色光,当单色光通过吸收池时,一部分被样品吸收,其余未被吸收的光到达检测器,被转变为电信号,经电子电路的放大和数据处理后,通过显示系统给出测量结果。
光源: 提供符合要求的入射光,有热辐射光源和气体放电光源两类。热辐射光源用于可见光区,一般为钨灯和卤钨灯,波长范围是350~1000nm;气体放电光源用于紫外光区,一般为氢灯和氘灯,波长范围是180~360nm。
单色器: 将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束,它是分光光度计的心脏部分。
吸收池: 又称比色皿,供盛放试液进行吸光度测量之用,其底及两侧为毛玻璃,另两面为光学透光面,为减少光的反射损失,吸收池的光学面必须完全垂直于光束方向。根据材质可分为玻璃池和石英池两种,前者用于可见光光区测定,后者用于紫外光区。
检测器: 是将光信号转变为电信号的装置,测量吸光度时,并非直接测量透过吸收池的光强度,而是将光强度转换为电流信号进行测试,这种光电转换器件称为检测器。信号显示系统:是将检测器输出的信号放大,并显示出来的装置。
操作规程
1、打开仪器开关,仪器自检后,进入测试界面。
2、在测试界面,点击“设置”按钮,进入设置界面,进行参数设置。设置波长范围,选择测试方式(吸光度或透过率),设置样品类型(液体或固体),设置测试时间等。
3、设置完成后,返回测试界面。放置好样品,点击“开始测试”按钮,仪器开始测试。
4、测试完成后,仪器自动显示测试结果(吸光度或透过率)。关闭样品室盖,将样品取出。
5、如连有打印机,可将测试结果打印出来。
6、关闭仪器电源。
可能遇到的问题
测定时出现负值
a可能是,仪器电压不稳定,测定时的电压和调零的电压不同,会产生偏差,电压波动过大,测定偏差越大,出现负值。
b可能是人员操作失误,参比池和测量池调换了。
读数跳动
测量过程中,紫外光区读数跳动,可见光区读数稳定,可能是氘灯出现问题,需要更换。
吸光值能不能大于1
根据朗伯比尔定律A=lg(1/T)=Kbc,吸光值大于1是正常的,大于10也很正常,因为1/T有可能是无穷大。但是吸光值大于1时标准曲线会弯曲,所以控制吸光值在0.2-0.8之间是准确性最高的。
透光率调100%时显示LOER
原因分析:样品架在移动时,没移到位,挡光了,光路没有对齐
透光率调100%时显示EL
原因分析:光源故障,或氘灯坏,或分光器坏。